稳固细胞株构建筛选公司

2015-10-21

会见量：

尊龙凯时提供从动物模子到细胞功效检测的全程手艺效劳，拥有专业的稳固细胞株构建职员，在细胞功效检测领域可以举行细胞迁徙、侵袭、凋亡、周期、增殖检测、细胞药物筛选等手艺效劳。稳固表达细胞株指在细胞中一连稳固表达特定基因或滋扰特定基因表达。稳转细胞株的目的基因质粒DNA整合到细胞染色体上，使细胞恒久稳固表达该基因或一连滋扰目的基因。

稳固细胞株效劳项目
1、基因过表达稳转细胞细胞系构建效劳（基因过表达多克隆细胞株构建效劳、基因过表达单克隆细胞株构建效劳）：因过表达细胞株构建效劳包括目的基因过表达慢病毒载体构建、病毒包装、细胞转染和筛选。您只需提供目的基因的cDNA质粒和需要构建的细胞系，我们将凭证您的要求完成目的基因过表达细胞株的构建和检测，提供应您高质量的基因过表达稳固细胞株。
2、RNAi基因敲减稳转细胞株筛选效劳（RNA滋扰基因敲减细胞株多克隆构建效劳、RNA滋扰基因敲减细胞株单克隆构建效劳）：英兴旺业的RNAi基因敲减细胞系构建基于慢病毒表达系统，一样平常接纳U6启动子驱动的pLVshRNA-puro或pLVshRNA-EGFP(2A)puro载体构建RNA滋扰稳固细胞株，效劳内容包括滋扰载体构建、靶点筛选、滋扰效率验证及稳固细胞筛选和克隆。

3、CRISPR基因敲除稳固细胞株构建效劳：随着talen和Cas9/gRNA基因敲除系统的泛起，基因定点敲除的难度大幅下降。全新的手艺将基因敲除从价钱高昂，耗时漫长的ZNF系统，逐渐酿成轻盈的研究工具。现在我们可提供Talen和Cas9/gRNA两个系统的基因敲除效劳。包括基因敲除靶点设计，talen质粒组装，Cas9/gRNA质粒构建及基因敲除效率验证。

稳固细胞株建设

稳固转染细胞株效劳流程
a、载体构建：将外源基因构建到合适的载体上。
b、细胞筛选浓度测定：以10-14天细胞所有殒命的抗生素浓度为筛选浓度。
c、细胞接种：转染实验前天接种细胞，种种细胞的平板密度依据种种细胞的生长率和细胞形状而定。举行转染当天细胞应抵达60%-80%笼罩。
d、细胞转染：用构建好的载体转染目的细胞。
e、使用抗生素对细胞举行筛选。
f、筛选效果判断。

稳固细胞株筛选要领

1、转染质粒后，单克隆要领筛选稳固细胞系：对大大都细胞转染效率较低。关于基因过表达，若是转染效率抵达40%，基因过表达尚可。可是关于基因滋扰实验，对转染效率要求远远高于基因过表达，通常质粒转染无法知足。

另外，质粒游离于细胞质中，很快降解，无法知足较长时间的检测项目；质粒转染整合几率极低，稳固细胞株构建耗时耗力，且得率很低，往往需要挑取单克隆株。
2、病毒熏染筛选稳固细胞株：病毒熏染要领较质粒转染筛选单克隆要领更利便和高效，是现在主流的稳固细胞系筛选要领。用慢病毒制备稳转细胞株，由于其高效整合、高效转录、高效表达、宿主规模广，熏染效率高，且与细胞染色体整合而不爆发基因重排，是制备稳固细胞株的理想载体。

效劳特点
1、稳固：包管15代以内稳固转染细胞稳固表达。
2、迅速：一样平常控制在1个月以内完成构建。
3、经济：价钱实惠，性价比高。
4、质量包管：对外源基因举行严酷判断。

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