抗体制备效劳公司

2015-10-19

会见量：

抗体的制备效劳

凭证制备的原理和要领，抗体制备效劳可分为三类：多克隆抗体、单克隆抗体、基因工程抗体。

：尊龙凯时多克隆抗体制备效劳拥有专业的抗体制备职员、先进的抗体制备生产仪器、引进先进的制备手艺，尊龙凯时凭证客户需求专业打造制备计划，主要提供的动物选择包括兔、小鼠、大鼠等。

：尊龙凯时单克隆抗体制备效劳内容（1）免疫和ELISA检测：客户提供卵白质或多肽与载体卵白（如KLH）偶联，需要约4mg卵白质免疫源或5~10mg多肽，免疫5只Balb/c小鼠，采血用ELISA举行检测。（2）融合和帅�。河眯∈笃⑾赴牍撬枇鱿赴傩腥诤�，获得的杂交瘤细胞通过增殖和ELISA筛选获得高效价的克隆。（3）亚克隆和交付效果：挑选两个最好的克隆举行亚克隆和亚型判断，交付效果包括每个克隆一瓶细胞核5ml作育上清。

：研究乐成的基因工程抗体有：嵌合抗体、重构抗体、小分子抗体等。

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一、多克隆抗体制备效劳

大大都自然抗原物质(如细菌或其渗透的外毒素以及种种组织因素等)往往具有多种差别的抗原决议簇，而每一决议簇都可刺激机体爆发一种特异性抗体。
多克隆抗体是多个抗原决议簇刺激机体后，由多个免疫淋巴细胞渗透的多种抗体的混淆物。

抗体制备

多克隆抗体的制备要领

由于这种抗体是不均一的，无论是对抗体分子结构与功效的研究或是临床应用都受到很大限制，因此称为第一代抗体；

二、单克隆抗体制备
在机体淋巴组织内可保存千百种抗体形成细胞(即B细胞)，每种抗体形成细胞只识别其响应的抗原决议簇，当受抗原刺激后可增殖分解为一种细胞群，这种由简单细胞增殖形成的细胞群体可称为细胞克隆(clone)。
统一克隆的B细胞可合成和渗透在理化性子、分子结构、遗传标记以及生物学特征等方面都是完全相同的均一性抗体，亦可称之为单克隆抗体。单克隆抗体为只针对某一特定的抗原决议簇，纯度高的抗体，因此称为第二代抗体。

1、优点
（1）制备时不需纯化抗原就可获得纯抗体；　　�。�2）有很高的效价
（3）有高度的简单性、均一性；　　　　　　　（4）产量高，且可一连生产

2、单克隆抗体制备基来源理
体内免疫法很难获得单克隆抗体，如能将所需要的抗体形成细胞选出，并能在体外举行作育，就可以获得已知特异的单克隆抗体。

杂交瘤细胞：既具有骨髓瘤细胞能大宗无限生长滋生的特征，又具有抗体形成细胞合成和渗透抗体的能力。这种抗体是由识别一种抗原决议簇的细胞克隆所爆发的均一性抗体，故称之为单克隆抗体。
应用杂交瘤手艺可获得险些所有抗原的单克隆抗体，只要这种抗原能引起小鼠的抗体应答。
（1）DNA合成
　① 主要途径：参考生物化学，可被氨基喋呤(A)所阻断
　② 旁路途径：使用次黄嘌呤(H)和胸腺嘧啶核苷(T)合成DNA；
　　　　　　　所需要的酶为次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)、胸腺嘧啶核苷激酶(TK)。
（2）骨髓瘤细胞：泉源于BABC/ c小鼠的骨髓瘤细胞系；没有合成抗体的能力；体外具有无限生长滋生的能力；损失合成HGPRT和TK的能力；只能通过主要途径合成DNA；在含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A) 、胸腺嘧啶核苷(T)的HAT作育基中不可生长。
（3）免疫淋巴细胞：通常泉源于BALB/c小鼠的脾淋巴细胞；具有合成抗体的能力；具有合成HGPRT和TK的能力；能通过主要途径和旁路途径合成DNA；HAT作育基中能生长，但短命，只能存活几天，体外不具有无限生长滋生的能力
（4）融合剂：Kohler和Milstein最早仙台病毒；厥后发明聚乙二醇（PEG）的融合效果更好，且阻止了病毒的污染问题。
（5）杂交瘤细胞：具有合成抗体的能力(从免疫淋巴细胞获得)；具有合成HGPRT和TK的能力(从免疫淋巴细胞获得)；能通过主要途径和旁路途径合成DNA；HAT作育基中能生长；体外具有无限生长滋生的能力(从骨髓瘤细胞获得)。
（6）饲养细胞：单个或少数细胞在体外作育很难成活，必需加入其他细胞以增添细胞密度，维持其代谢，使之成活滋生；被加入的这种细胞称为“饲养细胞”。最常用的小鼠腹腔巨噬细胞。

3、单克隆抗体制备历程：
制备抗原 → 免疫动物 → 免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备 → 细胞融合 → 杂交瘤细胞的选择作育 → 杂交瘤细胞的的筛选
→ 杂交瘤细胞的克隆化 → 单克隆抗体的检定 → 杂交瘤细胞系的建设 → 单克隆抗体的大宗制备（动物体内诱生法和体外作育法）

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4、单克隆抗体的应用
（1）诊断试剂：用于州病原体以及肿瘤的诊断。
（2）治疗试剂：兽医临床上熏染病的治疗；医学临床上抑制器官移植倾轧、治疗自身免疫疾病、制备生物导弹。
（3）检测试剂：州病原体毒力因子的检测；种种免疫细胞及其它组织细胞外貌分子的检测。

三、基因工程抗体(genetically engineering antibody)
自1975年单克隆抗体杂交瘤手艺问世以来，单克隆抗体在医学中被普遍地应用于疾病的诊断及治疗。但现在绝大数单克隆抗体是鼠源的，临床重复给药时体内爆发抗鼠抗体，使临床疗效削弱或消逝。因此，医学临床上最理想的单克隆抗体应是人源的,但人-人杂交瘤手艺现在尚未突破。
现在较好的解决步伐是能研制基因工程抗体，以取代鼠源单克隆抗体用于临床�；蚬こ炭固逍似鹩�80年月早期，是使用DNA重组手艺，在分子水昭雪抗体基因举行切割、拼接或修饰，某人工合成后导入受体细胞表达，从而爆发的新型抗体，也称为第三代抗体。

研究乐成的基因工程抗体有：嵌合抗体、重构抗体、小分子抗体等。

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