生物天生具有免疫功效，当细菌、病毒等侵入人体时，在免疫功效正常运作下，就算生病了也能治愈� ；竦眯悦庖呷毕葑酆险鳎ˋIDS）是由人类免疫缺陷病毒（HIV)所引起的熏染病，hⅳ所攻击的正是人体免疫系统的中枢细胞—t4淋巴细胞，致使人体损失对抗能力。艾滋病是一种无法治愈的疾病，确诊艾滋病，意味着要恒久斗争，因免疫系统遭受HIV的杀绝性攻击，免疫功效遭到破损而逐日低下，若是得不到有用控制，最终可导致一系列时机性熏染和恶性肿瘤。在地球上，平均每分钟都有一个孩子死于艾滋病，有凌驾1500万的儿童由于艾滋病而失去怙恃。中国艾滋病病毒熏染人数在全球居第十四位，更以每年百分之四十的速率递增，防治艾滋病任重道远，需要全社会配合起劲。
Nef是一种HIV编码的辅助卵白，通过下调主要的组织相容性I类表达来逃避被细胞毒性T淋巴细胞（CTL）杀死，从而增强了致病性，因此急需要一种能恢复MHC-1的有用Nef抑制剂来增进免疫介导的HIV熏染细胞的扫除。研究职员发明在HIV熏染的细胞中MHC-I的恢复陪同着CTL介导的熏染细胞扫除率的提高，与Nef的基因缺失相当。因此研究职员提出CMA作为治疗Nef的抑制性先导化合物，以增强免疫介导的HIV熏染细胞的扫除。
克日，揭晓在《PANS》上的一篇文章形貌了一种药物的发明，该药物可以资助免疫系统消除熏染了HIV的难以杀死的细胞。HIV建设了无法治愈的长期性熏染，因此需要开发新的要领来增强HIV熏染细胞的扫除率。HIV编码Nef，它可以下调熏染细胞中MHC-1的表达，从而损害细胞毒性T淋巴细胞的免疫介导扫除。伴刀豆球卵白A恢复了MHC-1，并通详尽胞毒性T淋巴细胞增强了HIV熏染的原代细胞的扫除率。伴刀球霉素A抵消了针对多种MHC-1同种异型的HIV进化枝中的Nef，批注其具有普遍的治疗用途。
自然产品抑制剂的筛选
图片泉源：PANS
为了判断能够逆转HIV熏染细胞中MHC-1下调的Nef抑制剂，研究职员举行了高通量流式细胞术筛选。选择HLA-A2作为MHC-1的代表性等位基因，由于Nef强烈靶向HLA-A等位基因以举行下调，HLA-A2在差别族裔中含量很高，并且具有高亲和力单克隆抗体有针对HLA-A2的选择性抗体。筛选了20,000多种自然产品提取物，确定了37种在主筛选中为阳性，在计数器筛选中为阴性。
Plecomacrolides具有差别的Nef抑制作用和溶酶体中和能力
plecomacrolide治疗相关的毒性可能是由其抑制V-ATPase引起的，V-ATPase抑制了许多细胞历程，包括溶酶体酸化。为了确定溶酶体pH的抑制是否可能导致表达Nef的细胞中MHC-1下调的逆转，研究职员通过丈量比例荧光来丈量人类单核细胞衍生巨噬细胞的溶酶体pH内切葡聚糖。首先证实Baf A1完全中和了溶酶体pH，然后在一定浓度规模内测试了每种plecoacrolides。有趣的是，Nef的最有用抑制剂CMA不是V-ATPase的最有用抑制剂。相反，Baf C1（EC 50 = 7.3 nM）比CMA（EC 50 = 12.7 nM，P < 0.0001）更有用地中和溶酶体，而CMA 与Baf A1（EC 50 = 18.5 nM，P = 0.06）具有可比性。
图片泉源：PANS
由于CD4 + T细胞不可有用地内切葡聚糖，以是用Lysotracker Red染料评估了这些细胞中的溶酶体中和作用，该染料可自由穿详尽胞膜直至抵达酸性隔室，并在那里质子化并保存。如通过流式细胞术和共聚焦显微镜，则EC 50为在原代CD4溶酶体中和通过CMA + T细胞显著抑制比EC 50更高Nef。综上这些效果批注，CMA在无毒且不会改变溶酶体pH的浓度下抵消了CD4 + T细胞中的Nef 。
CMA与Nef的基因删除相比可提高CTL介导的HIV熏染细胞的扫除
图片泉源：PANS
研究职员假设CMA可以消除Nef介导的HIV熏染细胞免受HIV特异性CTL的� ；�，为了直接对此举行测试，举行了体外流式细胞术CTL杀伤测定。如先前视察到的熏染了Nef缺失病毒的PLAP +原代细胞被CTL有用扫除，相反CTL介导的被Nef病毒熏染的细胞的扫除均显着镌汰。然而，熏染了Nef的病毒并用0.5 nM CMA处置惩罚的细胞恢复了HLA-A2的表达，并且PLAP +子集被CTL有用消除。CMA对杀死HIV熏染的细胞的CTL的作用与Nef的基因缺失是无法区分的，由于熏染Nef的病毒的细胞扫除率没有增添。主要的是，当未来自缺乏HLA-A2的供体的靶细胞与CTL共作育时，无论PLAP +靶细胞是否用CMA举行了处置惩罚都没有镌汰，验证了CTL的特异性并证实CMA仅在Nef和特异性抗HIV CTL反应同时保存时才增强HIV熏染细胞的扫除率。关于两个测试的CTL克隆，Nef依赖性CMA处置惩罚细胞的杀伤率在统计学上均具有统计学意义（P < 0.0001）。这些视察效果证实，低剂量CMA处置惩罚表达Nef的细胞可恢复HLA-A2，该卵白准确加载了HIV衍生肽，可以乐成地呈递给CTL而不会损害对CTL衍生的裂解信号的响应性。
CMA逆转了原代细胞中Nef介导的HLA-B的下调
图片泉源：PANS
研究职员试图确定CMA是否会恢复HIV熏染细胞中的HLA-B表达，HLA-B同种异型的序列差别将其分类为HLA-Bw4和HLA-Bw6血清型，每种血清型都可以用单克隆抗体检测，可是这些抗体与某些HLA-A（Bw4）和HLA-C（Bw6）同种异型具有交织反应。先前研究职员确定了一个供体，该供体对Bw4（B * 51：01）和Bw6（B * 07：02）是杂合的，并且与HLA-C的交织反应性极小，这使研究职员可靠地丈量两个HLA-B等位基因的表达。视察到在熏染了ΔGPE的细胞中，HLA-B * 51：01和HLA-B * 07：02均显著下调， Nef和CMA对该供体中两个HLA-B等位基因的影响与一系列供体中HLA-A * 02的影响相似。因此得出结论，CMA可以有用抵消Nef介导的原代CD4 + T细胞中HLA-A和HLA-B同种异型的下调。
效果与讨论
总而言之，与Nef的基因缺失相比，在HIV熏染的细胞中恢复细胞外貌MHC-1可以提高CTL的扫除率，从而证实了恢复的MHC-1具有呈递病毒抗原的功效。别的，发明CMA在HIV熏染的细胞中还原了MHC-1的多种同种异型，并且CMA处置惩罚增强了nef等位基因和MHC-1等位基因的所有组合的抗原呈递，这些效果批注通过这种机制抑制Nef可能具有普遍的临床适用性。
此项研究仍有一些局限性需要进一步探索，CMA恢复了HIV熏染的原代T淋巴细胞中多种MHC-1同种异型的表达，但仅对简单MHC-1同种异型确认了CTL杀伤，可能需要进一步降低毒性和对CTL的负面影响或增强活性的化学修饰以用于临床。别的，还需要使用动物模子举行其他研究，以确定CMA在体内的毒性和功效。数据批注，CMA有用地增强了CTL介导的扫除作用，因此现在仅限于自动熏染的原代T细胞，并且可能无法转化为体内重新活化的静止细胞的扫除作用。
总之CMA可以有用地恢复免疫介导的HIV熏染细胞的扫除，这种要领有可能在差别的免疫情形中普遍增强抗HIV免疫力。因此，研究职员建议将CMA作为进一步生长为Nef的治疗抑制剂的先导化合物，这是现在通过消除残留病毒库来治疗HIV的一项主要行动。尊龙凯时在艾滋病的药物研究方面积累了多年的履历，艾滋病药物的药代动力学和清静性评价等方面的手艺已经很是成熟，尊龙凯时会一连关注此项研究希望，望艾滋病药物可以早日问世，造福全人类。
关于尊龙凯时
尊龙凯时（股票代码：688202）建设于2004年，总部位于上海，致力于为全球制药企业、研究机构及科研事情者提供全方位的临床前新药研究效劳。尊龙凯时的一站式综合效劳以强有力的项目治理和更高效、高性价比的研发效劳助力客户加速新药研发历程，效劳涵盖医药临床前新药研究的全历程，包括药物发明、药学研究及临床前研究。尊龙凯时与海内外优质客户配合生长，为全球凌驾700家客户提供新药研发效劳，尊龙凯时将继续驻足全球视野，聚力中国立异，为人类康健孝顺实力！
联系尊龙凯时
Email: marketing@medicilon.com.cn
电话: +86 (21) 5859-1500（总机）
相关新闻
