尊龙凯时免疫学检测手艺剖析效劳

2016-05-11

会见量：

免疫学检测手艺剖析效劳

? 免疫印迹
? 免疫共沉淀
? ELISA
? 免疫组化
? 免疫荧光

尊龙凯时以抗体平台为焦点建设了一系列相关的后续免疫学检测平台，有ELISA,,WesternBlot等。
ELISA检测的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。产品的量与标本中受检物质的量直接相关，凭证呈色的深浅举行定性或定量剖析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的效果，使测定要领抵达很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。

Western Blot是凭证抗原抗体的特异性连系检测重大样品中的某种卵白的要领，用于检测经电泳或黑点杂交后牢靠于膜上的卵白质的检测。特异、稳固的液态酶标抗体和响应的底物，包管了快速、准确的检测；而阻止了放射性物质的使用，现已成为卵白剖析的一种通例手艺，对卵白举行定性和半定量剖析。

免疫检测手艺

免疫学检测手艺

一、抗原抗体反应
二、淋巴细胞的检测手艺
三、免疫学常用的分子生物学手艺

1、抗原抗体反应

抗原抗体反应的特点：特异性、可逆性、阶段性、可见征象；
抗原－抗体反应的分类：沉淀反应、凝集反应、免疫标记手艺；
其中免疫标记手艺是指用荧光素、酶及放射性同位素示踪物质标记抗原(或抗体)举行抗原抗体反应，通过示踪物质来检测未知抗原或抗体的一种要领。该要领可提高迅速度。对抗原或抗体举行定性或定量及定位。

2、淋巴细胞的功效测定手艺

（一）淋巴细胞的疏散：
①外周血单个核细胞疏散
②淋巴细胞亚群的疏散及判断（外貌标记选择性、纯化淋巴细胞亚群）

（二）淋巴细胞的功效测定手艺
体外法：
淋巴细胞增殖实试验
细胞毒试验
酶联免疫黑点法（enzyme-linkedimmunospot, ELISPOT）
体内法：
①OT试验(细胞免疫）
②细胞因子检测：机体的免疫细胞(如淋巴细胞、单核巨噬细胞)及非免疫细胞能爆发差别种类的细胞因子，它们在免疫应答中起调控作用。细胞因子检测是判断机体免疫功效的主要指标，对某些疾病的诊断、病程视察、预后判断等是十分须要的。

检测要领：
a.生物学活性检测(Bioassay)：依赖细胞株增殖法/靶细胞杀伤法/细胞病变抑制法/细胞因子诱导产品剖析法
b.免疫学检测法：由于细胞因子具有抗原性，以是可以应用抗原-抗体反应来定量检测；ELISA：应用细胞因子的单克隆抗体和多克隆抗体；ELISPOT：Enzyme-linked immunospot assay,酶联免疫黑点试验；流式细胞仪
c.分子生物学检测法：应用细胞因子的探针举行检测
d.生物芯片检测

3、免疫学常用的分子生物学要领

①免疫印迹：高辩白率的凝胶电流与免疫化学剖析手艺相连系杂交手艺，具有凝胶电流剖析的容量大高区分率和免疫化学剖析的敏感度高、特异性强等优点。免疫印迹手艺用来检测卵白质特征、表达及漫衍的最常用的要领。

②免疫PCR：抗原与抗体反应与 PCR 手艺相连系的一种新手艺，原理同 ELISA，差别的是 PCR 的放大系统取代了酶标记的放大效应，此要领可丈量微量抗原或抗体。

免疫检测手艺的应用

免疫检测手艺以普遍应用于生物科学的各个领域。
1.免疫疾病诊断
用免疫血清学要领对人和动物熏染病、寄生虫病、肿瘤、自身免疫病和失常反应疾病举行诊断，是免疫手艺最突出的应用。尤其是酶标抗体手艺，已成为多种熏染病的通例诊断要领，如已有的人各型肝炎、猪瘟等 ELISA 试剂盒，它们轻盈、快速，又具有高度的敏感性和可重复性。

2.动物植物心理运动研究
动植物中保存一些如激素、维生素等活性物质，它们在体内含量极微少，但在调理机体的心理运动中起主要作用，因此通太过析测定这些生物活性物质的含量及转变来研究机体的种种心理功效（如生永生殖等）。由于这些物质含量极低，用通例化验要领难以准确测出。现在放射免疫测定和酶免手艺已能准确测出 ng(10 -9 g) 及 pg(10 -12 g) 水平的物质，它们已成为测定动物、植物、昆虫中微量激素及其它活性物质，研究动物、植物心理和生物防治的主要手段。

3.物种及微生物判断
种种生物之间的差别都可体现在抗原性差别，物种种源越远，抗原性差别越大，因此可用区分抗原性的血清学反应举行物种判断、物种的分类等事情。血清学反应在细菌、病原菌等微生物判断和血清型及亚型的剖析方面已获得普遍应用。但对动物种源，植物和昆虫分类方面照旧一个新的领域。

4.动物、植物性状的免疫标记
通太过析动物、植物的一些优良性状（如高产、优质、抗逆性等）的特异性抗原，然后用血清学要领举行标记选择育种，这是一个很有前途的偏向，它比分子遗传学标记选择育种轻盈。

5.免疫增强药物和疫苗的研究
疫苗研究中需用血清学反应和细胞免疫手艺测定免疫的效果。在研究一些免疫增强药物，尤其研究肿瘤药物时，需用细胞免疫手艺剖析测定它们对机体细胞免疫功效的增强作用。由于细胞免疫是机体抗肿瘤、抗病毒的一个主要机制。

6.发病机理研究
熏染病的病原从机体特定部位熏染，并在特定组织细胞内增殖，引起发病。一荧光抗体熏染或免疫酶组化染色，可在细胞水平上确定发病等病原微生物的熏染细胞，还可用于研究自身免疫病和失常反应性疾病的发病机理，如免疫复合物的沉积部位的剖析。

7.分子生物学研究

在基因工程的疏散、克隆的筛选，表达产品的定性与定量剖析，表达产品的纯化等均涉及到免疫手艺。如通常用免疫沉淀要领疏散 mRNA 基因，酶标抗体核酸探针（地高辛核酸探针）检测筛选克隆，免疫转印手艺剖析表达产品的分子量、 ELISA 或 RIA 剖析表达量、免疫亲和层析纯化表达产品，免疫要领剖析表达产品的性子如免疫原性。免疫手艺已是分子生物学研究中必不可少的工具。

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