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iTRAQ实验手艺效劳

2017-06-27

会见量：

iTRAQ手艺原理：

iTRAQ试剂为可与氨基酸N端及赖氨酸侧链毗连的胺标记同重元素(isobaric)。在质谱图中，任何一种iTRAQ试剂标记的差别样本中的统一卵白质体现为相同的质荷比。
在串联质谱中，信号离子体现为差别质荷比(114～117)的峰，因此，凭证波峰的高度及面积，可以获得卵白质的定量信息。

iTRAQ试剂结构：

iTRAQ试剂是一种小分子同重元素化学物质，包括三部分：

一端是报告部分 reporter group；
另一端是肽反应部分 peptide reactive group；
中心部分是平衡部分 balance group。

其中： reporter group：质量为114Da、115 Da、116 Da、117 Da，因此iTRAQ试剂共四种。
? peptide reactive group：将reporter group与肽N端及赖氨酸侧链毗连，险些可以标记样本中所有卵白质。
? balance group：质量为31 Da、30 Da、29 Da、28 Da，使得四种iTRAQ试剂分子量均为145 Da，包管iTRAQ标记的统一肽段m/z相同。

图1 iTRAQ 试剂结构

综上：
4个泉源差别的相同卵白样品在一级质谱上体现相同；
Balance group在二级质谱爆发中性丧失；
Reporter group 在二级质谱爆发４个报告离子，划分是114、115、116和117；

通太过析报告离子的峰强度比值就可以剖析统一个卵白在差别样品间的表达量比值。

操作流程：

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iTRAQ手艺主要特点：

1.疏散能力强、剖析规模广
2.定性剖析效果可靠，可以同时给出每一个组分的分子量和富厚的结构信息
3.MS具备高迅速度、检测限低
4.剖析时间快，疏散效果好
5.自动化水平高
6.iTRAQ手艺不但可发明胞浆卵白，尚有膜卵白、核卵白、胞外卵白7.iTRAQ手艺可检测出低品貌卵白、强碱性卵白、小于10KD或大于200KD的卵白

iTRAQ实验手艺效劳 iTRAQ手艺简介